Protein Konsantrasyonu Hesaplayıcı

Kategori: Biyoloji
- 02 Haziran 2025
| |
Tipik değerler 0.5 ile 2.0 arasında değişir
Standart küvetlerin yol uzunluğu 1 cm'dir
Örnek ölçümden önce seyreltildiyse (örneğin, 5 = 1:5 seyreltme)

280 nm'deki absorbans (A280) kullanılarak protein konsantrasyonu Beer-Lambert Yasası kullanılarak belirlenir:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

burada:

  • \( C \) = Protein konsantrasyonu (mg/mL)
  • \( A \) = 280 nm'deki absorbans
  • \( \epsilon \) = Ekstinksyon katsayısı (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Küvetin yol uzunluğu (cm)

Protein Konsantrasyon Hesaplayıcı Nedir?

Protein Konsantrasyon Hesaplayıcı, aşağıdakiler de dahil olmak üzere farklı yöntemler kullanarak protein konsantrasyonunu belirlemeye yardımcı olur:

  • 280 nm'deki Absorbans (A280): Aromatik amino asitlere dayanan hızlı ve yıkıcı olmayan bir yöntem.
  • Bradford Testi: Boya bağlama kullanan bir kolorimetrik yöntem.
  • BCA (Bisinçoninik Asit) Testi: Bakır indirgeme ve kolorimetrik tespiti temel alan bir yöntem.
  • Lowry Testi: Protein-bakır etkileşimlerini kullanan köklü bir yaklaşım.

Hesaplayıcıyı Nasıl Kullanırım

Protein konsantrasyonunu hesaplamak için bu adımları izleyin:

  • Ölçüm yöntemini seçin (A280, Bradford, BCA veya Lowry).
  • Gerekli değerleri girin, örneğin absorbans, seyreltme faktörü ve ekstinksyon katsayısı (gerekirse).
  • Standart eğri yöntemi (Bradford, BCA veya Lowry) kullanıyorsanız, eğri parametrelerini girin.
  • Konsantrasyon sonucunu almak için "Hesapla" butonuna tıklayın.

Hesaplayıcıyı Kullanmanın Faydaları

  • Konsantrasyon hesaplamalarını otomatikleştirerek zaman kazandırır.
  • Esneklik için birden fazla ölçüm yöntemini destekler.
  • Belirli konsantrasyonlar hazırlamak için bir seyreltme hesaplayıcısı içerir.
  • Manuel hesaplamalarda insan hatasını azaltır.

Sıkça Sorulan Sorular

1. Absorbans (A280) yöntemi ne kadar doğrudur?

A280 yöntemi genellikle saf proteinler için doğrudur ancak nükleik asitler gibi kontaminantlardan etkilenebilir.

2. Tüm proteinler için Bradford Testi kullanabilir miyim?

Bradford Testi çoğu protein için iyi çalışır ancak protein bileşimine bağlı olarak değişken sonuçlar verebilir.

3. BCA Testi'nin avantajı nedir?

BCA yöntemi deterjanlarla daha uyumludur ve Bradford'dan daha geniş bir lineer aralığa sahiptir.

4. A280 için doğru ekstinksyon katsayısını nasıl seçerim?

Bilinen proteinler için yayımlanmış değerleri kullanın veya amino asit bileşimine dayalı olarak ekstinksyon katsayısını hesaplayın.

5. Neden bir seyreltme faktörüne ihtiyacım var?

Örneğiniz ölçümden önce seyreltildiyse, doğru son konsantrasyonu elde etmek için hesaplanan konsantrasyonu seyreltme faktörü ile çarpmanız gerekir.